En el 1625 su esposo muere después de una larga enfermedad. Hace voto de viudez a Dios. Se pone bajo la dirección, de San Vicente que la orienta y la encamina al servicio de los pobres. La responsabiliza de la marcha de las Caridades, las cuales llegan a multuplicarse en todo París.
A través de sus andanzas por las aldeas y calles llega a una conclusión: "Las caridades no podían subsistir si no tenían a su cuidado personas entregadas del todo por su vocación". Encuentra a la primera joven, Margarita Naseau, que inicia el camino de la Caridad.
El 29 de noviembre de 1633 se reunen con Luisa cinco jóvenes voluntarias con deseos de trabajar por los pobres. Con ellas nace la Compañía de las Hijas de la Caridad. París es un hervidero de pobres. De todas partes reclaman a las Hijas de la Caridad.
Ellas, sostenidas y alentadas por San Vicente y Santa Luisa, multiplican su respuesta: se ocupan de los enfermos en sus domicilios, de los niños abandonados, galeotes, ancianos, enfermos mentales ... Santa Luisa las instruye y orienta.
En 1660 a la muerte de Luisa de Marillac había más de 50 casas y habían llegado también a Polonia.
Fue beatificada por el Papa Benedicto XV, el 9 de mayo de 1920 y su canonización tiene lugar el 11 de marzo de 1934 por el Papa Pío XI.
El 10 de febrero de 1960 el Papa Juan XXIII la proclama "celestial patrona de los que se dedican a la acción social cristiana".

Su fiesta se celebra el 15 de marzo.